非接触式超声波DNA打断仪通过超声波空化效应与机械剪切力的协同作用,实现DNA分子的快速打断,其核心打断方法及优势如下:
一、打断方法:
空化效应的产生
仪器通过压电转换器将电信号转换为高频声波(通常为20-100 kHz),在液体介质(如DNA溶液)中传播时,声波压力交替变化形成高压区和低压区。
低压区产生微小气泡(空化泡),这些气泡在超声波的负压相作用下迅速生长,并在高压相作用下瞬间破裂,释放出冲击波和微射流。
机械剪切力的作用
冲击波和微射流具有很高的能量和速度(可达100 m/s),能够穿透DNA分子链,通过剪切力直接断裂DNA双链或单链。
空化泡破裂时产生的局部高温(约5000 K)和高压(约1000 atm)进一步增强剪切效果,但这一过程在液体中瞬时完成,对DNA的损伤较小。
非接触式操作
超声波通过离心管或反应容器壁直接穿透至样品,无需探头与样品直接接触,避免了传统接触式打断仪可能引入的样品污染和交叉污染。
样品置于独立的全封闭试管中,实验安全性更高,尤其适用于无菌或高价值样品(如临床样本、稀有基因组DNA)。
二、技术优势:
片段大小可控
通过调节超声波参数(功率、频率、作用时间、脉冲间隔),可准确控制DNA片段的平均长度(如100-500 bp),满足二代测序(NGS)、染色质免疫共沉淀(ChIP)等实验需求。
例如:设置超声功率为100W、工作时间20s、间隔10s、总时长4分钟,可将全基因组DNA打断为平均266bp的片段,99-503bp区间占比达89.33%。
高通量处理能力
仪器通常配备多通道适配器(如8通道、16通道或32通道),可同时处理多个样品,单次实验通量显著高于传统接触式打断仪。
莱恩德DNA打断仪20-400Khz混频超声功能,频率自适应,能适应多种样本处理需求,提高破碎效率。
打断效果均一
超声波在液体中具有广泛的分布性和穿透性,结合旋转离心管或三维聚焦技术,可确保样品各区域受到均匀的剪切力,避免局部过度打断或未打断。
毛细管电泳检测结果显示,非接触式打断的DNA片段分布集中,目标长度片段得率高。
低温保护与生物安全
仪器可配备低温恒温槽(如4℃),防止超声过程中样品过热,保护DNA完整性。
全封闭操作避免气溶胶传播,降低生物危害风险,符合实验室生物安全要求。
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